固相萃取，簡稱SPE，是近年發(fā)展起來一種樣品預處理技術，由液固萃取柱和液相色譜技術相結合發(fā)展而來，主要用于樣品的分離、純化和濃縮，與傳統(tǒng)的液液萃取法相比較可以提高分析物的回收率，更有效的將分析物與干擾組分分離，減少樣品預處理過程，操作簡單、省時、省力。廣泛應用在醫(yī)藥、食品、環(huán)境、商檢、化工等領域。

在實驗當中，使用SPE的過程中常常會遇到各種各樣的問題，如回收率、流速、極性等問題。而具體問題需要具體分析，因為面對不同實驗，各個實驗室的實驗技術、環(huán)境及時間都是不一樣的，這也導致問題原因也各不相同。

SPE的回收率偏低是最常見的問題，最常見的原因可能就是目標物沒有被小柱填料保留，或者目標物沒有wan全洗脫。

原因1：SPE柱的極性不合適。

解決方法：選擇其他低極性或者選擇性弱的SPE柱。

原因2：洗脫溶劑不夠強，無法將目標物化合物從SPE柱上洗脫。

解決方法：改變洗脫溶劑的pH，以增加其對目標化合物的親和力。

原因3：洗脫溶劑體積太小。

解決方法：增加溶劑體積。

在同一批SPE產(chǎn)品中，SPE的流速可能會存在快慢不一的情況，而SPE流速過快不利于目標化合物在填料上的保留，也會極大影響溶劑與目標化合物或者填料的相互作用，從而影響保留或者洗脫過程。過慢則會增加實驗時間。

原因1：填料量、緊密度等小柱因素會影響流速的快慢。

解決方法：可借助固相萃取裝置或者泵流操作架等進行流速控制，流速低于5mL/min時結果較為穩(wěn)定，部分實驗需更慢。流速較慢則可施加外力增速。

原因2：樣品存在過多的顆粒，小柱堵塞，導致流速降低。

解決方法：對樣品進行過濾或者離心。

原因3：樣品溶液粘度太大。

解決方法：可用溶劑對樣品進行稀釋。

填料存在最大吸附量上限，當超過最大吸附量上xian時會造成小柱吸附超載，從而導致目標物流失。同時在未規(guī)定SPE規(guī)格的情況下，也可根據(jù)吸附容量去計算合適的填料規(guī)格。

1.硅膠基質：柱容量一般不超過SPE填料質量的5%，例如100mg/mL的C18小柱可以保留5mg的化合物。

2.聚合物基質：柱容量是硅膠基質吸附劑的3倍，一般不超過SPE填料質量的15%，例如100mg/mL的BRP小柱可以保留15mg的化合物。

3.離子交換吸附劑：交換容量為0.25-1mmol/g，1mmol/g表示1g吸附劑能吸附1mmol的一價帶電物質。

在使用固相萃取小柱進行樣品前處理時，若出現(xiàn)萃取效果重現(xiàn)性差，可能的原因及改進辦法如下：

原因1：上樣前柱床干涸。

解決辦法：重新活化并平衡SPE小柱。

原因2：過柱流速過快。

解決辦法：降低流速。

原因3：清洗溶劑洗脫能力太強。

解決辦法：先讓洗脫液滲入小柱，然后再對小柱進行抽真空或者加壓，并控制流速1-2mL/min。

原因4：超出小柱的載樣能力。

解決辦法：減小載樣量，或者換用填料規(guī)格更大的SPE小柱。

在使用SPE的過程中，可能會因為小柱、溶劑、實驗技術等的選擇，導致最終的凈化結果達不到預期效果。

原因1：凈化模式不適用。

解決辦法：可優(yōu)化凈化模式，通常而言采用保留目標化合物的模式會比保留雜質的模式凈化效果好，如果正在分析的項目為某一種或某一類化合物分析，可以采用保留目標化合物的凈化模式。如果不止一種SPE柱可用于目標化合物的凈化時，也可挑選選擇性好的吸附劑，一般離子交換>正相>反相。

原因2：淋洗液或者洗脫液不適用。

解決辦法：根據(jù)實驗優(yōu)化淋洗液或者洗脫液。

原因3：SPE小柱當中存在少量干擾物。

解決辦法：對SPE小柱進行合理處理，將SPE柱有效活化。