小伙伴們平時(shí)使用最多的就是反相色譜柱（RPC）和正相色譜柱（NPC），當(dāng)我們遇到化合物在正相模式下強(qiáng)保留，在反相模式下不保留或保留很弱的情況時(shí)該怎么選擇色譜柱呢？

相信小伙伴們的第一反應(yīng)是用HILIC色譜柱，那今天小編就和大家分享一下親水模式色譜柱的作用機(jī)理和日常維護(hù)，希望對大家有所幫助。

HILIC柱也叫親水作用色譜柱，是正相色譜柱的一種變化，即固定相是極性填料，使用的流動(dòng)相是甲醇、乙腈、水等極性溶劑。極性物質(zhì)在親水作用色譜里優(yōu)先被保留，這意味著很多在反相色譜里保留很弱的物質(zhì)可以使用親水作用色譜分離。

親水模式色譜常見的固定相鍵合類型有：純硅膠、氰基、二醇基、酰胺基和兩性離子等。

在HILIC模式下，溶劑極性順序：水>甲醇>乙醇>異丙醇>乙腈>丙酮，在此模式下不建議同時(shí)使用水和甲醇作為流動(dòng)相，因?yàn)檫@兩種溶劑的洗脫能力強(qiáng)。

HILIC模式的保留機(jī)理綜合了液液分配、離子交換作用和氫鍵作用，具體如下：

//溶質(zhì)分子首先在主體流動(dòng)相與色譜填料表面的半固定的高極性水膜之間發(fā)生液液分配；

//次級保留作用包括色譜填料表面硅醇基和/或極性官能團(tuán)與帶電分析物間發(fā)生的離子交換作用；

//氫鍵作用發(fā)生在帶正電的分析物與帶負(fù)電的表面硅醇基之間。

其主要應(yīng)用包括：

1、分離在反相色譜上不保留或保留較弱的化合物；

2、分離正相模式下強(qiáng)保留化合物。

新柱是保存在純乙腈中的，所以小伙伴們拿到色譜柱后需先用純乙腈低流速活化后再使用（若測試方法中使用了含緩沖鹽的流動(dòng)相，先用70%乙腈水過渡）。

HILIC系列色譜柱的日常維護(hù)和保存（建議反沖）：

當(dāng)色譜柱使用一段時(shí)間后，出現(xiàn)壓力升高、峰形異常、柱效降低、分離度下降等異常情形時(shí)，先用過渡流動(dòng)相（70%乙腈）沖洗掉色譜柱中的緩沖鹽，再按照如下方式?jīng)_洗（建議反沖）：

HILIC Amide柱、HILIC-NH₂柱、HILIC-Silica柱