C18液相色譜柱的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
C18液相色譜柱的流動(dòng)相配制：
a、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力，并且保證樣品不會(huì)在色譜柱內(nèi)析出或長(zhǎng)時(shí)間留在色譜柱內(nèi)；
b、流動(dòng)相不與樣品發(fā)生反應(yīng)；
c、流動(dòng)相粘度盡量小，使樣品得到高效分離的同時(shí)降低柱壓，延長(zhǎng)色譜柱壽命；
d、流動(dòng)相沸點(diǎn)不能太低，避免有氣泡產(chǎn)生，影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)行；
e、流動(dòng)相要保證現(xiàn)配現(xiàn)用，不能儲(chǔ)存太久，避免流動(dòng)相生成雜質(zhì)微生物影響檢測(cè)；
f、流動(dòng)相使用前先脫氣。
C18液相色譜柱污染再生技術(shù)：
色譜柱污染后，可以用合適的溶劑沖洗，使柱效再生。
常規(guī)的再生洗滌方法是：分別用甲醇、三氯甲烷、甲醇/水各60mL依次通過(guò)色譜柱，再用100%甲醇60mL平衡色譜柱后封存，柱效將恢復(fù)正常。必要時(shí)，根據(jù)柱污染性質(zhì)(如有機(jī)污染、鹽類(lèi)污染等)，采用0.05mol/LH2SO4、0.5mol/LH3PO4或0.1mol/LEDTA鈉鹽沖洗，然后再用水沖洗，用100%甲醇平衡色譜柱后封存。對(duì)于嚴(yán)重污染的色譜柱，可采用水、甲醇、乙烷依次沖洗后，按順序倒過(guò)來(lái)再?zèng)_洗1次，每次所用溶劑60mL，不接檢測(cè)器，用甲醇平衡色譜柱封存。
